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OncoImmunin專有技術

更新時間:2020-03-27      點擊次數:1890

OncoImmunin專有技術

彩虹線

 

 

 

 

 
目標:解決方案:
子彈與細胞凋亡,細胞介導的細胞毒性,自噬,轉移,炎癥和病毒感染性有關的蛋白酶的肽底物。
新型的細胞和組織可滲透的熒光底物,可接觸活細胞和組織的所有環境。
子彈診斷細胞凋亡,細胞介導的細胞毒性,自噬,轉移,炎癥和病毒感染性。
子彈細胞和組織可滲透抑制劑,可抑制細胞凋亡,自噬,轉移,炎癥和病毒感染。
對細胞和組織可滲透底物的OncoImmunin設計的修改:蛋白酶識別位點上不可裂解的鍵的取代
子彈藥物輸送車
使用OncoImmunin的分子設計可實現細胞和組織的通透性
子彈將寡核苷酸引入活細胞和動物,特別是人類,而不會造成損害,傷害或毒性。

 

 

 

OncoImmunin,Inc.設計,合成,驗證并申請了專有的新型分子,可以用作熒光蛋白酶底物,用于測定活細胞以及血清寡核苷酸(例如siRNA)的體內遞送酶活性,無毒性以及在溶液中表現出優異性能后復活或小分子藥物在體內試驗中均未通過

與其他熒光底物相比,OncoImmunin蛋白酶底物的優勢是4倍:

子彈選擇熒光探針以確保不僅在溶液中而且在生物學樣品(例如血清,活細胞和組織)中準確測定酶活性。
子彈可以使用標準熒光顯微鏡觀察細胞內蛋白酶的活性-無需任何修改! 
子彈為了確保特異性,所有底物均包含來自切割位點兩側的氨基酸序列,即從P n至P n '。
子彈底物在溶液中呈環狀構象,可模仿天然存在的靶分子的活性位點環狀構象。
 

OncoImmunin的熒光蛋白酶底物設計允許使用熒光顯微鏡確定細胞內酶活性。緩沖液和人血清中活性的測定可以使用標準熒光計完成,或者對于大樣品通量,可以使用專有的高通量篩選(HTS)系統(請參閱頁面)

注-吸收率測量也是可能的。

要了解有關OncoImmunin,Inc.及其酶活性測定試劑盒的更多信息,請從下面的類別中進行選擇:

原理:熒光團的選擇;底物設計和切割;顯微鏡檢查
彈性蛋白酶底物:溶液測量;全細胞應用
細胞凋亡檢測試劑盒:caspase-3(CPP32)和ICE;流式細胞儀 微粒

快來了!-用于鈣蛋白酶,纖溶酶原激活物和Xa因子的檢測試劑盒

 

熒光蛋白酶底物的基本原理

菜單

 

彩虹線

 

 

熒光團的選擇

進行熒光團的選擇,使得激發和發射都在可見波長范圍內。選擇這種特定染料的理由是,生物材料包含在紫外線波長域中既吸收又發出熒光的分子。這種自發熒光會阻礙樣品中少量活性的測定,并降低活性測定的可靠性。

基板設計和計算機建模結構

肽底物與共價偶聯的熒光團合成。后者在策略上遠離靶序列,以確保不干擾蛋白水解切割。

彈性蛋白酶底物的代表性計算機模型結構如下所示,其中黃帶代表肽主鏈構象,青色代表附著的熒光團。綠色箭頭表示切割位點。

顯示了該肽的兩個不同視圖。

 注意:首先,肽主鏈具有類似于
 SERPINs反應位點環中發現的環構象。

 第二,青色染料部分形成二聚體。這進一步穩定
 了肽主鏈構象。可以
 通過形成非熒光基態二聚體來適合地描述這種分子構型。

卵裂誘導的熒光和吸收變化

在完整的肽中,青色熒光團形成基態二聚體。該基態二聚體的吸收光譜可以用激子理論來適合地描述。肽裂解消除了這種染料與染料的相互作用,并導致熒光增加和吸收變化顯著。

 

彈性蛋白酶測定彩虹線

 

 

該彈性蛋白酶測定法可在多種條件下工作。在溶液或細胞懸液中進行測定。即使在顯微鏡下!

例如,一種應用是使用熒光酶標儀篩選抗炎藥候選物。用豬胰彈性蛋白酶測定的該底物的Km在800 nM范圍內,而其他基于pNA和AMC生色團的生色底物的Km值分別為6.2和0.8 mM [請參見MJ Castillo,K. Nakajima,M [Zimmerman and JC Powers Anal Biochem 99:53-64(1979)]。

當您認為現在可以在您認為不可能的條件下測量彈性蛋白酶活性時,這確實是技術驅動型科學的一個例子。

沒有其他彈性蛋白酶檢測法是喜歡的!

敏感 - 與公里在NM-800,這是熒光,所有后
廣泛適用的 - 澄清溶液,血清,細胞懸浮液,或在顯微鏡載玻片上

從下面的應用筆記中選擇:

溶液測量
全細胞

您也可以將這些熒光底物用于:

  1. 流式細胞儀分析
  2. 組織學冰凍切片

帶有支持數據的應用筆記即將發布

凋亡測定和試劑彩虹線

 


要求特殊的介紹價格。
PhiPhiLux ®是美國專有技術; 其他美國專有技術和PCT申請正在申請中。

與OncoImmunin的CaspaLux ® 基材,胱天蛋白酶的-1,6,8和活動-9可以被測量。此外,通過以互補色組合5種不同的底物,可同時通過流式細胞術和顯微鏡在活細胞中確定多種caspase活性。高通量分析也是可用的。 

披披士半胱天冬酶具有細胞滲透性的熒光底物有兩種顏色:(單擊圖標可下載協議)
半胱天冬酶綠色紅色
半胱天冬酶1onc1_gr.gif(743字節)CaspaLux ® -1 -電子1 d 2onc1_gr.gif(743字節)CaspaLux ® -1 -電子22
半胱天冬酶6onc1_gr.gif(743字節)CaspaLux ® -6 - J 1 d 2onc1_gr.gif(743字節)CaspaLux ® -6 - J 2 d 2
半胱天冬酶8onc1_gr.gif(743字節)CaspaLux ® -8 L - 1 d 2onc1_gr.gif(743字節)CaspaLux ® -8 L - 2 d 2
半胱天冬酶9onc1_gr.gif(743字節)CaspaLux ® -9 -中號1 d 2onc1_gr.gif(743字節)CaspaLux ® -9 -中號22
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