proteinslides Maleimide surfaces說明書

Maleimide surfaces

馬來酰亞胺表面

應(yīng)用說明： 

馬來酰亞胺基團(tuán)與巰基基團(tuán)之間的共價(jià)連接是生物綴合化學(xué)中選擇性，容易，方便的反應(yīng)之一。現(xiàn)在，我們已經(jīng)在ZeroBkg®表面上提供了這種喜愛的反應(yīng)。

研究科學(xué)家，臨床實(shí)驗(yàn)室和診斷試劑盒制造商的共同目標(biāo)是，開發(fā)一種提供宜生物活性而不產(chǎn)生生物分子損失，移位或表面遷移的固相環(huán)境。一種可能的方法是在不使用任何特殊標(biāo)簽或化學(xué)修飾的情況下，輕松且共價(jià)固定蛋白質(zhì)分子。這可以通過化學(xué)反應(yīng)性基團(tuán)馬來酰亞胺朝蛋白質(zhì)分子表面上可用的巰基（–SH）基團(tuán)方便地實(shí)現(xiàn)。我們開發(fā)了基于零背景PEG涂層的馬來酰亞胺表面，如圖1所示。馬來酰亞胺衍生化的表面與二硫鍵基團(tuán)共價(jià)結(jié)合，該硫基基團(tuán)在二硫鍵還原后或通過用特殊試劑引入SH基團(tuán)對(duì)伯胺進(jìn)行化學(xué)修飾后可用于生物分子中。PEG的功能性確保了特定分子與表面的結(jié)合僅通過在測(cè)定過程中與固定的蛋白質(zhì)分子的特異性相互作用來解決，并且解決了常見的背景問題。

圖1.零背景馬來酰亞胺表面由反應(yīng)性雙鍵組成，束縛在高密度PEG涂層上。蛋白質(zhì)分子通過表面–SH基團(tuán)連接，但被PEG涂層排斥。多余的-SH基團(tuán)可通過簡(jiǎn)單的洗滌步驟輕松停用。相同的固定化反應(yīng)適用于肽，抗體和寡核苷酸。	圖2.在馬來酰亞胺-PEG /載玻片上制備的染料偶聯(lián)的寡核苷酸（-SH）和抗體微陣列（手動(dòng)點(diǎn)樣）的熒光圖像。每個(gè)斑點(diǎn)的直徑約為500 um。

為了證明性能，我們?cè)趫D2中顯示了在Mal / PEG /載玻片上制備的巰基綴合的寡核苷酸微陣列（上圖）和抗體微陣列（下圖）。簡(jiǎn)而言之，將納升的染料結(jié)合的寡核苷酸（30聚體）或含有10％甘油的抗體溶液的液滴沉積在載玻片上，并孵育30分鐘。在室溫下，用鈍化緩沖液去除殘留區(qū)域中的SH-基團(tuán)30分鐘。通過與cy3偶聯(lián)的二抗孵育來檢測(cè)表面上的固定抗體。載玻片在激光掃描儀上成像。重要的結(jié)果是由于PEG涂層而導(dǎo)致的本底極低。Mal / PEG涂層的載玻片是含有游離–SH基團(tuán)的生物分子的理想選擇。二硫鍵結(jié)合蛋白質(zhì)中的兩個(gè)半胱氨酸殘基非常穩(wěn)定，

這些涂層可在標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡載玻片，蓋玻片，硅片上使用。我們還為特定的客戶樣品提供客戶涂層服務(wù)。我們的客戶已成功地將Mal / PEG表面應(yīng)用于各種應(yīng)用，包括蛋白質(zhì)傳感器，蛋白質(zhì)微陣列，單分子光譜，生物原子力顯微鏡和其他生物物理研究。