蛋白酶 K 是一種廣譜絲氨酸蛋白酶，在分子生物學中廣泛用于核酸的分離。 它于 1974 年被發現并從真菌 Tritirachium album 中提取。“蛋白酶 K"這個名字來源于酶消化頭發或角蛋白的能力。該酶被鈣激活，優先消化與脂肪族和芳香族氨基酸的羧基相鄰的蛋白質。雖然鈣不是維持酶活性所必需的，但它們確實有助于酶的穩定性。去除鈣離子后，酶的穩定性降低，蛋白水解活性部分喪失。蛋白酶 K 有兩個 Ca2+ 結合位點，位于活性中心附近，但不直接參與催化機制。該酶在 7.5 - 12 的廣泛 pH 范圍內穩定，最適 pH 值為 8.0。該酶在 37°C 時具有活性，并且活性隨溫度升高至 60°C 而增加。如果孵育時間延長并且蛋白酶濃度非常高，蛋白質將被*消化。因此，找到特定于每種樣品類型的最佳孵育時間非常重要。