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Avidity BirA生物素蛋白連接酶標準反應試劑盒說明書

發布時間:2018/3/27      點擊次數:3756

Avidity,LLC于1996年由Millard Cull,Larry Lansing,Ron Gill博士和Mark Seville博士創立,基于生物素對抗生物素蛋白或鏈霉親和素的非凡親和力開發肽標簽和分子生物學產品。在Affymax擔任研究人員的同時,Millard參與了AviTag技術的發現,發現了其商業潛力,并獲得了Affymax的*權利。他開始使用Avidity作為試劑公司,將AviTag技術的使用權授予其他公司,并銷售與該技術一起使用的產品。

帶有AviTag標簽的人類全長ORF克隆已經被構建在多種T7和CMV啟動子表達系統,可以立即購買使用。AviTag標簽蛋白可以被體內或體外的生物素連接酶生物素化,而且抗生物素蛋白或鏈霉親和素可以專一地與生物素結合,正基于這兩個反應,AviTag?技術可以應用于蛋白的固定,純化和顯影。 雖然Avidity是一個小公司,科學帶來的好處及其AviTag已得到認可。目前, AviTag技術已經在22個國家的世界制藥公司和研究人員中得到認可。 

隨著Avidity成熟,該公司正在擴大其科學視野,并調查使用生物發光 - 如在深海生物體中發現 - 使其產品對科學界更有用。Prolume有限公司的Bruce Bryan博士于2004年接觸AvidTag與Prolume的高斯熒光素酶和綠色熒光蛋白(GFP)結合使用。*款高斯AviTag產品于2007年11月發布。

此外,Avidity正在與幾家公司合作,通過將非常靈敏的光學傳感器與基于熒光素酶的測定相結合,開發出新一代高度移動,簡單,廉價且功能強大的診斷功能。結合BP蛋白質組學(新型測定生物化學),Prolume(發光/熒光分子和硬件創新專家),黑森林工程(光學器件工程),Avidity正在開發用于檢測和鑒定的蛋白質和DNA微陣列生物芯片和生物傳感器的疾病病原體和復合高通量篩選(HTS)。

 

 

  BirA生物素蛋白連接酶標準反應試劑盒

貨號:BirA500 

品名:BirA-500: BirA biotin-protein ligase standard reaction kit

 

產品信息

生物素蛋白連接酶(BirA的EC 6.3.4.15)activates形成生物素生物素和5′- adenylate轉移到生物素蛋白的生物素接受(如avitag™肽)。它也抑制功能的生物素操縱子。該基因編碼的蛋白是由BirA的基因。

 

BirA生物素 - 蛋白質連接酶(EC 6.3.4.15)以和靶向的方式通過ATP中間體(生物素5'-腺苷酸)共價加入生物素受體肽/蛋白質中的d生物素。酶促生物素化蛋白質的下游應用是多樣的,重要和有力的。*的生物素 - 抗生物素蛋白/鏈霉抗生物素蛋白相互作用通常用于親和層析或蛋白質固定在表面或底物上。通過抗生物素抗體或抗生物素蛋白/鏈霉親和素 - 報道酶結合物(-HRP,堿性磷酸酶)或熒光探針進行蛋白質檢測成為可能。生物素化MHC分子的多聚體形式是免疫生物學中的常用工具。

當與我們的AviTag TM生物素受體肽氨基酸序列組合使用時,生物素化發生在天然大腸桿菌BCCP底物的兩倍,比其他肽序列的生物素化多達一個數量級。因此,與其他可用序列相比,AviTagTM序列需要較少的BirA酶和較短的生物素化孵育時間才能完成。如果蛋白質不穩定或蛋白酶活動是關注的,這對下游成功可能是重要的。

我們的BirA酶是由birA基因編碼的大腸桿菌野生型,并通過傳統方法純化至大于99%的純度。

該酶的其他名稱包括:生物素連接酶;生物素操縱子阻遏蛋白;的birA;生物素全酶合成酶;生物素 - [乙酰-CoA羧化酶]合成酶;生物素 -[乙酰輔酶A羧化酶]連接酶;生物素 -[乙酰-CoA羧化酶]合成酶;乙酰CoA高脫羧酶合成酶;乙酰CoA高脫羧酶合成酶;生物素:apocar?boxylase連接酶;生物素全酶合成酶;HCS。

 

試劑盒組成:

兩瓶,每瓶20uL,1mg/mL BirA生物素蛋白連接酶(共40ug)

兩瓶,每瓶1.5mL,BiomixA(0.5M雙甘酯緩沖溶液,pH8.3)

兩瓶,每瓶1.5mLBiomixB(100mM ATP,100mM鎂(OAC)2,500uM d-生物素)

兩瓶,每瓶1.5mL額外的BIO-200(500uM d-生物素)

 

儲存條件:

試劑盒,干冰運輸,-80度保存。如解凍后使用,4度保存。解凍后的酶可以在液氮中重新儲存,-80度儲存。

其他組份,biomixa,biomixb和bio-200,-20度長期保存。biomixa和bio-200,在4度可短期儲存。Biomixb,-20度保存或者更低溫度儲存。

穩定性:生物素蛋白連接酶BirA,4度存放一個月,活性保留>80。長期保存-80度,每次解凍,酶活性降低10%。

實驗步驟:

以700 µl純化好的 MHC/peptide 復合物(1-2mg)為例,加入:100 µl BiomixA,100 µl BiomixB,100 µl d-biotin,10 µl BirA enzyme (30 µg),0.5 ul pepstatin (2 mg/ml in DMSO),0.5 µl leupeptin (2 mg/ml in dH2O)室溫孵育過夜(反應液中不要有EDTA)

 

 

 

https://www.avidity。。com/avitag/bira-500-bira-biotin-protein-ligase-standard-reaction-kit

 

我們公司zui大優勢是強大的采購,

1:基本什么都能進口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進口的,

2:貨品全,現經營過700多個品牌,基本所有生物試劑耗材都可以進口,特別是冷偏的產品那就更有優勢,

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7:我們還是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批發,歡迎合作。


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